البيانات الاساسيه

السيره الذاتيه

ا.د/ صابر محمد عبدالله : استاذ التوليد و اللتاسل و التلقيح الاصطناعى - كلية الطب البيطرى جامعة بنى سويف.
حاصل على جائزة اكاديمية العلوم الصينية عام 2014.
حاصل على جائزة العالم الهندى سى فلى رامان للباحثين الافارقة عام 2012.

عنوان رسالة الماجستير

دراسات وراثية خلوية فى الابقار و الجاموس و علاقتها بانخفاض الخصوبة

ملخص رسالة الماجستير

-

عنوان رسالة الدكتوراه

الاخصاب المعملى و تجهيز و فظ بويضات و اجنة الجاموس

ملخص رسالة الدكتوراه

الملخص العربى: تهدف الدراسة الحالية إلى معرفة التالى: • تاثير الفحص التناسلى الظاهرى للجاموس المذبوح والمتعلق بعمر الحيوان المذبوح والحالة التناسلية له و الحالة المورفولوجية للمبيض على اعدادا البويضات الناتجة من هذة المبايض و قدرتها على النمو • * تاثير استخدام وسط زراعة مختلف و بيئات تنشيط مختلفة للحيوانات المنوية و بيئات اخصاب مختلفة وبيئات زراعة مختلفة على قدرة البويضات على النمو. • تاثير اجراء طريقنين مختلفتبين للتجميد ( التجميد البطى Slow-freezeو طريقة التجميد السريع(Vitrification للبويضات الناضجة وكذتك قدرة هذة البويضات على الحياة و النمو فيما بعد • تاثير التجميد السريع على قدرة الحياة لكل من البويضات الغيرناضجة و البويضات الناضجة والأجنة المجمدة و ذ للك بعد الأذابة و كذلك قدرة البويضات الغير ناضجة و الناضجة المجمدة على النمو فيما بعد . • الفحص السيتوجينى للبويضات و كذلك فحص الأجنة و ذللك لتقييم عملية النضوج بالنسبة للبويضات و عملية الأنقسام بالنسبة للأجنة . فى هذة الدراسة تم الفحص بعد الذبح مباشرة حيث تم تسجيل عمر الحيوان المذبوح و الحالة التناسلية لة و الحالة المورفولوجية للمبض و بناءـ أ علي ذلك تم تقسيم المبايض الى الأتى :- مبايض الجاموس صغيرة السن و خصبة ( مجموعة 1 ) و مبايض الجاموس صغيرة السن وغير خصبة ( مجموعة 2 ) و مبايض الجاموس كبيرة السن و خصبة ( مجموعة 3 ) ومبايض الجاموس كبيرة السن وغير خصبة ( مجموعة 4 ) فى المعمل يتم سحب السائل الحويصلى المحتوى على البويضات الغير ناضجه بطريقة الشفط من الحويصلأت المبيضية ذات حجم 2-6 مم على بيئة ملأئمة معقمة من محلول الفوسفات المتعادل و تم فحص البويضات تحت الميكروسكوب و تجميعها فى طبق معقم و تقسيمها على حسب درجة احطتها بالخلأيا الوسادية الى ثلأث درجات و تم زراعتها بعد غسلها فى بيئة لزراعة الأنسجة (TCM -199) المحتوية على 10 % من مصل العجول و مادة الجنتاميسين كمضاد حيوى. تم زراعتها ( IVM ) بطريقتين :- • الطريقة الأولى (Model 1) المحتوية على (TCM-199) 10 % من مصل العجول ومادة الجنتاميسين كمضاد حيوى بواقع 50 سم3 و هرمونات PMSG and hCG • الطريقة الثانية :(Model 2) المحتوية على (TCM -199) و10 % من مصل العجول و مادة الجنتاميسين كمضاد حيوى. وقد لقحت البويضات الناضجة ( IVF ) بطريقتين : • الطريقة الأولى(Model 1) الحيوانات المنوية المجمدة و المنشطة فى وسط محلول التبرويد البيومين لأكتيت بيروفيت(TALP) المحتوى على الكافيين والهيبارين لمدة 10 ساعات. • الطريقة الثانية (Model 2) الحيوانات المنوية المجمدة و المنشطة فى وسط براكيت واوليفانت) (B.O) المحتوى على الكافيين والهيبارين لمدة 6 ساعات و نقلت بعد ذلك فى بيئة لزراعة الأنسجة (TCM -199) المحتوية على 10 % من مصل العجول ومادة الجنتاميسين كمضاد حيوى بواقع 50سم3 لمدة 48 ساعة اخرى حتى يحدث انقسام للبويضات المخصبة . حتى الأخصاب الذى يستدل علية بانقسام البويضة لخليتين او اربع او اكثر ثم زرعت بويضات الجاموس(IVC) المخصبة لمدة 5-7 ايام بطريقتين : • الطريقة الأولى (Model 1) المحتوية على (TCM - 199) و10 % من مصل العجول و مادة الجنتاميسين كمضاد حيوى والمضاف الية بعض الخلأيا المحيطة بالبويضات cumulus cells • الطريقة الثانية (Model 2) المحتوية على (TCM -199) و10 % من مصل العجول ومادة الجنتاميسين كمضادحيوى وتم رصد النمو الى مرحلة الموريلأ و مرحلة البلأستوسيست (IVMFC-derived embryos ) وقد تم التحضين اثناء التجارب فى حضانة خاصة مزودة بمصدر لغاز ثانى اكسيد الكربون ونسبة رطوبة تامة ودرجة حرارة 39 مئوية . وتم تجميد البويضات والأجنة كالتالى: • طريقة التجميد البطى Slow-freeze وطريقة التجميد السريع(Vitrification) بالنسبة للبويضات المخصبة وطريقة التجميد السريع ( (Vitrification بالنسبة للبويضات الغيرمخصبة والبويضات المخصبة والأجنة وتم زراعتها واخصابهابعد الأذابة بالنسبة للبويضات (IVM / IVF / IVC technique Model 2 و معرفة قدرتها على الحياة بعد الأذابة بالنسبة للأجنة . وللدراسة الكروموسومية تم تجميع البويضات والأجنة و اعدت للتحليل الكروموسومى و قد أثبتت نتائج هذة الدراسة الأتى : • وجود تأثير واضح للعمر والحلة التناسلية و الشكل المورفولوجى للمبيض على اعداد البويضات الغير ناضجة الناتجة من كل مبيض. • كانت اعداد البويضات الغير ناضجه (2.9 + 0.33 بويضه لكل مبيض ) فى مبايض الجاموس صغيرة السن و خصبة و (2.5 + 0.34 بويضه لكل مبيض ) فى مبايض الجاموس صغيرة السن وغير خصبة (1.37 + 0.37 بويضه لكل مبيض ) فى مبايض الجاموس كبيرة السن و خصبة (1.28 + 0.16 بويضه لكل مبيض ) فى مبايض الجاموس كبيرة السن وغير خصبة و كانت هناك فروق معنوية بينهم • كما وجد تاثير واضح للسن وحالة الخصوبة على نوعية و جودة البويضات . • كانت اعداد البويضات الغير ناضجة CCOC (0.79 + 0.27بويضه لكل مبيض ) فى مبايض الجاموس صغيرة السن و خصبة و (0.54 + 0.03 بويضه لكل مبيض ) فى مبايض الجاموس صغيرة السن وغير خصبة (0.23 + 0.06 بويضه لكل مبيض ) فى الجاموس كبيرة السن و خصبة (0.14 + 0.04بويضه لكل مبيض ) فى مبايض الجاموس كبيرة السن وغير خصبة و كانت هناك فروق معنوية بينهم . • كانت اعداد البويضات الغير ناضجه SCOC (1.2 + 0.2 بويضه لكل مبيض ) فى مبايض الجاموس صغيرة السن و خصبة و 0.47 + 0.18)بويضه لكل مبيض ) فى مبايض الجاموس صغيرة السن وغير خصبة (1.19 + 0.14 0بويضه لكل مبيض ) فى مبايض الجاموس كبيرة السن و خصبة0.43 + 0.11 بويضه لكل مبيض ) فى مبايض الجاموس كبيرة السن وغير خصبة و كانت هناك فروق معنوية بينهم . • البويضات الخالية من الخلأيا الوسادية Nude ( 0.65 + 0.07بويضة لكل مبيض ) كانت عالية فىصغيرة السن و غيرخصبة و ) 0.65 + 0.37 بويضه لكل مبيض ) فى مبايض الجاموس كبيرةالسن وغير خصبة ( 0.37 + 0.1بويضه لكل مبيض ) فى مبايض الجاموس صغيرة السن و خصبة (0.49 + 0.37 بويضه لكل مبيض ) فى مبايض الجاموس كبيرة السن و خصبة و كانت هناك فروق معنوية بينهم . أاما بالنسبة للبويضات الصالحة للزراعة • كانت اعداد البويضات الصالحة للزراعة ( 2.19 + 0.38 بويضه لكل مبيض ) فى مبايض الجاموس صغيرة السن و خصبة و0.66 + 0.07 بويضه لكل مبيض ) فى مبايض الجاموس صغيرة السن وغير خصبة 1.78 + 0.14 بويضه لكل مبيض ) فى مبايض الجاموس كبيرة السن و خصبة(0.64 + 0.39 بويضه لكل مبيض ) فى مبايض الجاموس كبيرة السن وغير خصبة و كانت هناك فروق معنوية بينهم . أما بالنسبة للبويضات الناضجة: • كانت اعداد البويضات الناضجه (1.79 + 0.39 بويضه لكل مبيض ) فى مبايض الجاموس صغيرة السن و خصبة و (0.35 + 0.11بويضه لكل مبيض ) فى مبايض الجاموس صغيرة السن وغير خصبة (1.25 + 0.11 بويضه لكل مبيض ) فى مبايض الجاموس كبيرة السن و خصبة0(1.1 + 0.16 بويضه لكل مبيض ) فى مبايض الجاموس كبيرة السن وغير خصبة و كانت هناك فروق معنوية بينهم . و كانت جودة البويضات كالتالى:- • كانت اعداد البويضات الناضجهExcellent (0.53 + 0.19 بويضه لكل مبيض ) فى مبايض الجاموس صغيرة السن و خصبة و (0.03 + 0.02بويضه لكل مبيض ) فى مبايض الجاموس صغيرة السن وغير خصبة (0.43 + 0.19 بويضه لكل مبيض ) فى مبايض الجاموس كبيرة السن و خصبة (0.04 + 0.02 بويضه لكل مبيض ) فى مبايض الجاموس كبيرة السن وغير خصبة و كانت هناك فروق معنوية بينهم . • و كانت اعداد البويضات الناضجهGood (0.93 + 0.16 بويضه لكل مبيض ) فى مبايض الجاموس صغيرة السن و خصبة و(0.13 + 0.05 بويضه لكل مبيض ) فى مبايض الجاموس صغيرة السن وغير خصبة0( 0.62 + 0.18 بويضه لكل مبيض ) فى مبايض الجاموس كبيرة السن و خصبة (0.09 + 0.07 بويضه لكل مبيض ) فى مبايض الجاموس كبيرة السن وغير خصبة و كانت هناك فروق معنوية بينهم . • كانت اعداد البويضات الناضجهPoor (0.35 + 0.50 بويضه لكل مبيض ) فى مبايض الجاموس صغيرة السن و خصبة و (0.18 + 0.05 بويضه لكل مبيض ) فى مبايض الجاموس صغيرة السن وغير خصبة (0.15 + 0.5 بويضه لكل مبيض ) فى مبايض الجاموس كبيرة السن و خصبة (0.18 + 0.05 بويضه لكل مبيض ) فى مبايض الجاموس كبيرة السن وغير خصبة و كانت هناك فروق معنوية بينهم . • • اما بالنسبة البويضات المنقسمة: • فكانت اعداد البويضات امنقسمة (1.17 + 0.25بويضه لكل مبيض ) فى مبايض الجاموس صغيرة السن و خصبة و (0.15 +0.19 بويضه لكل مبيض ) فى مبايض الجاموس صغيرة السن وغير خصبة (0.59 +0.08 بويضه لكل مبيض ) فى مبايض الجاموس كبيرة السن و خصبة( 0.16 +0.07 بويضه لكل مبيض ) فى مبايض الجاموس كبيرة السن وغير خصبة و كانت هناك فروق معنوية بينهم . • اما بانسبة للأجنة الناتجة : • كانت اعداد الجنة الناتجة كالتالى : (0.48 + 0.2 جنين لكل مبيض ) فى مبايض الجاموس صغيرة السن و خصبة و(0.04 +0.04 جنين لكل مبيض ) فى مبايض الجاموس صغيرة السن وغير خصبة (0.12 +0.03 جنين لكل مبيض ) فى مبايض الجاموس كبيرة السن و خصبة( 0.02 +0.04 جنين لكل مبيض ) فى مبايض الجاموس كبيرة السن وغير خصبة و كانت هناك فروق معنوية بينهم . أثبتت النتائج ان مبايض الجاموس صغيرة السن و خصبة ( المجموعة 1) كانت اعلى فى عدد البويضات الناتجة وكذلك قدرتها على النمو فيما بعد يليها مباشرة مبايض الجاموس كبيرة السن و خصبة ( المجموعة 2 ) . نتائج طريقة النضوج المعملى / الأخصاب المعملى / زراعة الأجنة المعملية باستخدام نموذج 1 و 2 - (Model 1 and Model 11) IVM / IVF / IVC techniques كالأتى : • ا كانت نسبة النضوج لبويضات الجاموس المزروعة فى النجارب التى اجريت باضافة الهرمونات (Model 1) كالتالى (82.5 % ) و فى(Model 2) (81.5 %) • و كانت نسبة البويضات الممتازة أ كثر فى (Model 1) (29.9% )عن ( (Model 2 (19.2 % ) دلت النتائج على ان معدل الأخصاب الخارجى كان اعلى عندتلقيح البويضات الناضجة بحيوانات منشطة فى وسط (Model 1) TALP (64.3 %) اذا ما قورنت بحيوانات منشطة فى وسط براكيت اوليفانت(B.O) ( Model 2 ) (48.0 %) • وكانت نسبة النمو لمرحلة البلأستيولأ مرتفعة بوضوح عند استخدام وسط زراعة الأنسجة (Model 1) cell TCM-199 , %10 FCS and cumulus( 41.0% ) بالمقارنة باستخدام وسط زراعة الأنسجة TCM-199 FCS ( Model 2 ) 10 % (27.2 % ) و يمكن تلخيص النتائج المتحصل عليها بعد التجميد كالأتى :- • وجدت اختلأفات معنوية فى نسبة الحياةو النمو فى البويضات الناضجة و مجمدة Vitrifiaction ) (6.7 ، 33.0 ، 70.6% ) . البويضات الناضجة و مجمدة Slow Freeze (4.4 ، 22.2 ، 61 %) وو جدت اختلأفات معنوية فيما بينهم . • واثبتت النتائج أن البويضات الناضجة و مجمدة بواسطة Vitrifiaction اكثر مقاومة للتجميد عنها فى البويضات الناضجة و مجمدةبواسطة Slow -freeze . • و نسبة الأخصاب فىالبويضات الغير ناضجة و مجمدة (49.3%) بالمقارنة بالبويضات الغير ناضجة و غير مجمدة ( 81.2 % ) والبويضات المنقسمة (13.3 % vs 41.3% )والأجنة الناتجة على التوالى (2.6% vs 11.3%) والبويضات الناضجة و مجمدة (33.0 %) بالمقارنة بالبويضات الناضجة و غير مجمدة (41.3 %) والأجنة الناتجةعلى التوالى ووجدت اختلأفات معنوية فيما بينهم (6.7% vs 11.4%) . • و نسبة النمو فىالبويضات الغير ناضجة و مجمدة (13.3 %) بالمقارنة بالبويضات الناضجة و مجمدة (33.0% )والأجنة الناتجة (2.6 % vs 6.7%) على التوالىووجدت اختلأفات معنوية فيما بينهم .و بذللك اتضح ان البويضات المخصبة تعطى اكثر بويضات منقسمة واجنة . • وجدت اختلأفات معنوية فى نسبة الحياة للبويضات الغير ناضجة و مجمدة (55.4 %) و البويضات الناضجة و مجمدة (70.6 %) و الأجنة المجمدة (79.4 %) وو جدت اختلأفات معنوية فيما بينهم . • واثبتت النتائج أن الأجنة اكثر مقاومة للتجميد عنها فى البويضات المخصبة ثم يليها البويضات الغير مخصبة . و يمكن تلخيص النتائج المتحصل عليها من الفحص السيتوجينى كالأتى :- • تم الفحص السيتوجينى للبويضات الناضجة ووجد ان عدد كروموسوماتها 25 كروموسوم من بينهم خمسة من الكروموسومات تحت وسطى السنترومير و عشرون من الكروموسومات طرفية السنترومير شاملة كروموسوم الجنس و(x) و هو الأكبر حجما بالنسبة للكروموسومات طرفية السنترومير . • وتم فحص السيتوجينى الأجنة ووجد ان التالى عدد الكروموسومات50 كروموسوم من بينهم خمسة ازواج من الكروموسومات تحت وسطى السنترومير و عشرون زوجا من الكروموسومات طرفية السنترومير شاملة كروموسوم الجنس و(xx) و هما الأكبر حجما بالنسبة للكروموسومات طرفية السنترومير . • و قد أثنتت نتائج الفحص السيتوجينى اهميتها فى اثبات حدوث النضوج بالنسبة للبويضات و الأخصاب و الأنقسام بالنسبة للأجنة.